自动细胞计数仪的使用方法1. 实验前准备仪器检查:开机预热(部分仪器需 10-15 分钟),检查镜头是否清洁,软件是否正常启动。试剂与耗材:准备台盼蓝染液(0.4%,过滤除菌)、无菌 PBS 或培养基(用于稀释细胞)、计数板(一次性或可重复使用,重复使用需用 75% 酒精清洁并晾干)。细胞悬液制备:将培养的细胞消化、吹打均匀,避免细胞成团(若有团块,需过筛或重新吹打)。2. 样本处理与上样稀释细胞:若细胞浓度过高(超过仪器计数范围,通常 1×10⁴-1×10⁷个 /mL),用培养基或 PBS 稀释至合适浓度(例如,取 100μL 细胞悬液 + 100μL 稀释液,稀释倍数为 2)。染色:按 1:1 比例混合细胞悬液与台盼蓝染液(如 50μL 细胞悬液 + 50μL 台盼蓝),轻轻混匀,室温静置 30 秒 - 1 分钟(避免染色过久影响细胞活性)。上样:用移液器取 10-20μL 混合液,缓慢滴加到计数板的进样口,使液体自然充满计数池(勿溢出),放置 1-2 分钟让细胞沉降。计数仪根据电脉冲的数量来计算细胞的数量,同时根据脉冲的大小来判断细胞的体积大小。苏州高灵敏多色荧光成像细胞计数仪要多少钱

全自动细胞计数仪:操作简便,能自动完成细胞计数的多个步骤,如自动上样、自动聚焦、自动染色等,减少了人为因素的干扰,提高了计数的准确性和重复性,同时具有较高的检测速度,可快速获取细胞计数结果,如 Countess 3 全自动细胞计数仪。半自动细胞计数仪:需要人工完成部分操作,如样品的准备、上样等,但在细胞计数和数据分析方面具有一定的自动化功能,价格相对全自动细胞计数仪较为便宜。手持式细胞计数仪:体积小巧,便于携带,适用于现场检测或小型实验室使用,操作简单,能够快速给出细胞计数结果,但在功能和准确性方面可能相对较弱。苏州高灵敏多色荧光成像细胞计数仪要多少钱基于高分辨率图像分析细胞形态特征(如直径、圆度、复杂度),并进行分类统计。

在药物研发、生物制药生产中,细胞计数仪是质量控制和实验效率的**保障:药物筛选与毒性评估:高通量筛选候选药物时,通过计数给药后活细胞数量,快速评估药物对细胞的抑制或杀伤效果;在药物毒性测试中,量化不同浓度药物处理后的细胞存活率,确定安全剂量范围。生物制药生产质控:疫苗、单克隆抗体等生物制品的生产依赖细胞培养,需实时监测细胞密度和活性,确保生产过程稳定(如CHO细胞、Vero细胞的培养监控)。细胞***产品研发与生产:在CAR-T、干细胞***等领域,需精确计数***用细胞的数量和活率(如要求活细胞比例≥90%),并监测细胞扩增过程中的状态,确保**终产品的安全性和有效性。
全自动细胞计数仪的非染色计数模式,避免了传统染色法可能造成的细胞死亡问题:全自动细胞计数仪的非染色计数模式是其在细胞检测领域的一大创新。传统的细胞计数方法通常需要使用染色剂对细胞进行染色,以便在显微镜下观察和计数。然而,染色剂可能会对细胞产生一定的毒性,导致部分细胞死亡,从而影响计数结果的准确性。全自动细胞计数仪的非染色计数模式则避免了这一问题。它利用细胞本身的光学特性,如散射光、荧光等,通过先进的光学系统和图像识别技术,实现对细胞的准确计数。这种非染色计数模式不仅减少了对细胞的损伤,还能更真实地反映细胞的原始状态,为细胞研究提供了更加可靠的数据。药物毒性评估:通过活性率变化判断药物对细胞的杀伤作用(如化疗药物 IC50 测定)。

高通量细胞计数仪常需处理复杂样本(如含杂质、细胞团、碎片的原代细胞、肿瘤细胞悬液等),需验证其在复杂条件下的准确性。验证方法:制备含干扰因素的样本:如添加细胞碎片、血清残留、死细胞比例高(>30%)的悬液,或含聚团的原代细胞(如肝细胞、神经细胞);用仪器计数,同时用手工计数(结合染色,如台盼蓝或AOPI)或流式细胞仪(“金标准”级方法)作为对照;重点观察仪器是否能:准确区分细胞与杂质/碎片;识别聚团中的单个细胞(避免少计);正确区分活细胞与死细胞(尤其低活率样本)。肿瘤细胞研究:分析化疗后细胞形态变化(如凋亡细胞皱缩、坏死细胞肿胀)。苏州高灵敏多色荧光成像细胞计数仪要多少钱
贴壁细胞(如 HEK293):需酶消化成单细胞悬液,优先选择光学成像法(避免消化不完全导致的细胞团干扰);苏州高灵敏多色荧光成像细胞计数仪要多少钱
在细胞和基因领域,对细胞产品“健康”状态的评估远超简单的“活”与“死”的二元划分。早期凋亡细胞虽然膜完整性尚未完全丧失(台盼蓝无法染色),但已进入程序性死亡路径,若被注入患者体内可能引发炎症或无效。因此,精细区分活细胞、坏死细胞和凋亡细胞至关重要。高速自动化细胞计数系统搭载的双荧光染色技术(通常使用吖啶橙AO和碘化丙啶PI)为此提供了强大工具。AO能穿透所有细胞的细胞膜,与DNA和RNA结合发出绿色荧光;而PI只能穿透膜受损的坏死细胞,与DNA结合发出红色荧光。通过荧光显微镜和特定滤光片,仪器可以清晰识别并定量三类细胞:活细胞(AO着色,绿色)、早期/晚期凋亡细胞(AO着色,膜通透性改变,可能呈现橙红色)以及坏死细胞(AO和PI双着色,红色)。这种精细的细胞亚群分析能力,使得在细胞产品生产的多个环节——从起始物料评估、生产过程监控到终制剂放行——都能实施更严格、更科学的质量控制,从而提升终产品的安全性与有效性预期。苏州高灵敏多色荧光成像细胞计数仪要多少钱