T7EndonucleaseI(T7EI)在CRISPR/Cas9基因编辑中的应用主要体现在突变体检测和基因编辑效率评估上。以下是T7EI在CRISPR/Cas9中的具体应用步骤和特点:1.**基因编辑效率评估**:-T7EI用于评估CRISPR-Cas9在给定的导向RNA靶位点上对细胞群体进行基因编辑的效率。-通过PCR扩增围绕CRISPR导向RNA靶位点的基因组DNA,如果CRISPR-Cas9介导的非同源末端连接(NHEJ)修复事件引入了突变,变性和退火将形成突变型和野生型PCR扩增子的异源双链DNA。2.**突变体检测**:-如果CRISPR/Cas9编辑成功在DNA上引入突变,则可与野生型DNA片段退火产生异质双链DNA。T7EI可以识别该DNA上的不完全配对的DNA位点然后进行双链切割,通过琼脂糖凝胶电泳即可显示酶切后的条带,从而半定量判定基因编辑效果。-T7EI能识别长度大于或等于2bp的插入、缺失或突变导致的错配DNA,不能识别1bp的插入、缺失或突变。3.**实验步骤**:-收集细胞并提取基因组DNA,然后使用PCR扩增期望编辑的基因组区域。扩增子的长度建议为0.5-1kb。-对扩增的DNA进行变性和退火复性,以产生异质双链DNA。-使用T7EI酶处理退火后的DNA产物,在37℃孵育15分钟。通过测序或基于PCR的方法(如T7E1酶切和测序)来验证gRNA的编辑效率,筛选出效率高的gRNA序列 。Recombinant Human RETN Protein,hFc Tag

重组人TIM-1蛋白是一种在哺乳动物细胞中表达的重组蛋白,融合了hFc标签,便于纯化和检测。TIM-1(T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域蛋白1)是一种共刺激分子,主要表达于T细胞、B细胞、树突状细胞和某些非免疫细胞表面,广参与免疫细胞的启动、增殖和细胞因子分泌,在免疫调节和过敏反应中发挥重要作用。TIM-1的功能与机制TIM-1通过其胞外区的Ig样结构域与配体(如TIM-4)结合,传递启动信号,促进T细胞的增殖和细胞因子分泌。TIM-1的信号转导依赖于其胞内段的免疫受体酪氨酸启动基序(ITAM),启动后可招募多种信号分子,如Syk和PI3K,进而调节免疫反应。此外,TIM-1在过敏反应中也发挥关键作用,其高表达与过敏病、特应性皮炎等疾病密切相关。TIM-1还参与调节免疫细胞的黏附和迁移,影响免疫细胞在炎症部位的浸润。重组人TIM-1蛋白(hFc Tag)的特点重组人TIM-1蛋白(hFc Tag)具有以下明显特点:高纯度:纯度≥95%(经SDS-PAGE和SEC-HPLC验证),确保实验结果的可靠性。低内素:内素水平<0.1 EU/μg,适合用于细胞实验和体内研究。功能完整:保留了天然TIM-1的配体结合位点和信号转导功能。hFc标签:便于通过抗人IgG抗体进行检测和免疫沉淀实验。

高灵敏度与特异性该试剂采用了优化的反应缓冲体系和抗体修饰的热启动TaqDNA聚合酶,能够显著提高扩增效率和特异性。即使在低拷贝数的模板条件下,也能实现稳定检测,例如某些产品可在3copies/反应的水平下实现稳定检出。此外,该试剂还通过添加抑制非特异性扩增的因子,进一步提升了多重反应的准确性。2.高效的多重检测能力MultiplexProbeqPCRMix(2×,UDGPlus)支持在同一反应体系中进行多达四重的靶基因检测。这种多重检测能力极大地提高了实验效率,减少了样本用量和检测时间,特别适用于需要同时检测多个基因或病原体的场景。3.强大的防污染系统试剂中包含的dUTP/UDG系统能够有效防止PCR产物的气溶胶污染,从而避免假阳性结果的出现。UDG酶在室温下即可发挥作用,确保实验数据的准确性和可靠性。4.快速扩增与操作简便该试剂支持快速扩增程序,可在短时间内完成qPCR反应,例如某些产品可在35分钟内完成45个循环。同时,2×预混液的设计使得实验操作更加简便,只需加入模板、引物和探针即可进行反应。
重组人Siglec-15(Recombinant Human Siglec-15)是一种经HEK293细胞表达、C端融合His标签的跨膜唾液酸结合凝集素,分子量约35 kDa,纯度≥95%(SDS-PAGE & SEC-HPLC),内素<0.1 EU/μg。该蛋白在瘤相关巨噬细胞、髓系抑制细胞及多种实体瘤表面高表达,通过与未知唾液酸化配体结合,启动DAP12-Syk通路,抑制T细胞增殖并促进PD-L1非依赖性免疫逃逸。本品保留天然N-糖基化位点,可在体外重建“Siglec-15-Fc”或“Siglec-15-His”功能复合物,用于SPR、BLI测定与小分子、抗体或CAR结构的亲和力;亦可包板于ELISA,高通量筛选阻断型抗体。冻干粉经0.22 μm过滤除菌,复溶后4℃稳定一周,-80℃长期储存避免反复冻融。配套提供生物素化版本(Biotin-Siglec-15),兼容链霉亲和素磁珠,实现瘤浸润免疫细胞的原位捕获与单细胞测序。每批次均通过阻断实验验证活性,附完整COA,是研究肿瘤免疫抑制机制与开发下一代免疫检查点抑制剂的关键试剂。泛素分子可以通过其内部的赖氨酸残基(如Lys48)与其他泛素分子形成多聚泛素链。

它虽微小,却承载着人类对生命奥秘探索的宏大梦想,为生物科学的进步贡献着不可替代的力量。Recombinant Human RETN Protein,hFc Tag
SYBRGreenqPCRMix(2×):助力定量PCR实验实时荧光定量PCR(qPCR)作为一种高效、灵敏的分子生物学技术,广泛应用于基因表达分析、病原体检测、基因分型等领域。SYBRGreenqPCRMix(2×)是一种专为qPCR设计的预混液,凭借其的性能和特点,成为分子生物学研究中的重要工具。产品特点SYBRGreenqPCRMix(2×)是一种2倍浓缩的预混液,包含qPCR反应所需的所有关键组分,如TaqDNA聚合酶、dNTP混合物、缓冲液、SYBRGreenI染料等。这种预混液的设计简化了实验操作流程,用户只需加入模板和引物即可进行反应。其成分SYBRGreenI染料能够特异性结合双链DNA,并在PCR扩增过程中发出荧光信号,荧光强度与DNA扩增产物的量成正比。这种实时监测机制使得qPCR能够精确地定量分析目标基因的初始拷贝数。产品性能SYBRGreenqPCRMix(2×)具有高灵敏度和特异性,能够检测低拷贝数的DNA模板,适用于多种复杂的样本类型。其优化的反应体系和热启动TaqDNA聚合酶确保了快速、高效的扩增效率,同时减少了非特异性产物的生成。Recombinant Human RETN Protein,hFc Tag
在生物科学的浩瀚宇宙中,AatII酶犹如一颗璀璨的星辰,以其独特的功能闪耀着。它是一种限制性核酸内切酶,宛如一位精细的“裁缝”,专门在DNA分子上施展“剪裁”技艺。AatII酶的识别序列是“GACGT”,一旦它在DNA链上找到这个特定的“密码”,便会毫不犹豫地在序列的特定位置将DNA链切断。这种精细的切割能力,让它在基因工程领域大放异彩。科学家们可以利用它将目标基因从复杂的基因组中精细地“剪切”出来,就像从一幅巨大的拼图中精确地取出需要的那一块。在构建基因表达载体时,AatII酶更是不可或缺的助手。它可以将目的基因与载体DNA在特定位置切开,然后通过DNA连接酶将它们无缝拼接在一起,从而构建出...